Med Rock Band 3 er det fundamentale gameplay som de foregående spil. Farvede brikker kommer flyvende ned af skærmen, og du skal trykke på de korrekte knapper i takt med, at de kommer ned i bunden af skærmen. Den basale formel er der ikke pillet ved, og for fans er der lavet en masse underliggende ændringer, der vil forfine spiloplevelse yderligere, såsom harmonierne fra The Beatles: Rock Band og betydeligt bedre menu-struktur. De mere åbenlyse ændringer kommer dog i to varianter: Keyboardet og Pro-Mode.

Keyboardet er det femte instrument i konstellationen, og bringer en del mere synth og piano lyde til sangudvalget. Keyboardet kan spilles i to varianter: Der er den typiske fem kolonners stil, som gør brug af fem tangenter på keyboardet, hvor det minder meget om hvordan en guitar spilles i Rock Band. Brugen af keyboardet på denne måde er ganske simpelt, og man skal kun bruge en hånd for at nå henover de fem forskellige tangenter, hvilket i starten føltes en smule ukompliceret, men efter et par sange dukker kompleksiteten og udfordringen stille og roligt op, som man bevæger sig op af sværhedsgraderne.

Det er værd at understrege, at man ikke behøver keyboardet eller nogle af de andre nye instrumenter for at spille Rock Band 3. Hvis man købte Beatles pakken, så vil den uden videre fungere helt perfekt. Alle de 83 nye sange på Rock Band 3 skiven kan spilles uden keyboardet, og vil fungere præcis som den nuværende Rock Band oplevelse gør.

Mere vovet bliver det når Pro-Mode aktiveres. Her gør du brug af alle 22 tangenter på keyboardet, og der er tale om, en mere eller mindre komplet realistisk gengivelse af hvordan det er at spille et rigtigt keyboard.
Pro-Mode er dog ikke eksklusivt til keyboardet, men spænder også til de andre instrumenter i Rock Band.  Trommerne vil i Pro-Mode gøre brug af hi-hattene, der kan sættes til trommerne, og pludselig spiller du på et fuldt ud funktionelt trommesæt, der forlanger du bevæger dig rundt på trommesættet, og følger sangene præcis som en rigtig trommeslager ville. Bassen vil også få en Pro-Mode, hvor du kan leve dine bassist-drømme ud. Der vil dog ikke være udstyr specifikt til bassister, i stedet må de nøjes med at bruge et af de forskellige Pro-Mode guitar instrumenter og undlade at bruge den sidste streng.

Guitaren er det instrument som unægtelig har fået mest opmærksomhed. Der vil med udgivelsen af Rock Band 3 blive produceret to helt nye guitarer, bygget specifikt til Pro-Mode. Den ene guitar er en Fender Mustang, en plastik guitar med 102 knapper, hvor hver knap repræsenterer en position som du ville holde fingrene på hvis det var en rigtig guitar. Den har desuden seks plastik strenge placeret, hvor strengene ville sidde på en normal guitar. Mustang guitaren er ment som det næste naturlige skridt for dem, der ikke ønsker at kæmpe med strenge på en guitar, og vil have muligheden for at få konstant respons på ens fingerplacering takket være de mange knapper på guitaren. Mustangen er en smule kortere end en rigtig guitar, og vejer desuden betydeligt mindre.

Hvis man vil gå det fulde skridt, så er der Fender Squier guitaren. Dette er en rigtig guitar, en fuldt ud funktionel almindelig Fender Squier der kan tilsluttes en forstærker og spilles med som om den aldrig har været andet. Udover at fungere som en rigtig guitar kan den også tilsluttes Rock Band 3, hvor den i praksis opfører sig som Mustang guitaren, idet den kan læse hvor du placerer dine fingre på guitaren. Til forskel fra Mustangen, så er Squier guitaren en rigtig guitar, og dermed så vil de evner du påtager dig i Pro-Mode overføres til den virkelige verden. Hvis du kan spille ”Imagine” i Pro-Mode, så kan du samle en hvilken som helst guitar op og gøre det udenfor spillet. Rock Band 3 er ikke kun fokuseret på at være et underholdende festspil i dets normale måde at spille på, men også et reelt værktøj hvor du lærer at spille musik i Pro-Mode.

Med tilføjelsen af Pro-Mode og keyboardet, puster Harmonix store mængder nyt liv i deres serie, og de formår at bringe elementer til genren som ikke er set før, og det er svært ikke at være begejstret overfor potentialet der ligger i at bruge Rock Band 3 som begyndelsen til manges musikalske karriere. Hvis man dog ikke ønsker den komplicerede oplevelse som Pro-Mode er, så er der intet der står i vejen for at man kan spille Rock Band som man har gjort de sidste mange år, og med muligheden for at eksportere sangene fra Rock Band 1 og 2, samt alt udgivet DLC, ind i Rock Band 3. Så er der musik nok til de næste mange fester.

Rock Band 3 udkommer på PS3, Wii og Xbox 360 til oktober, hvor Fender Mustangen, de nye trommer og keyboardet vil være klar samme dag som spillet. Fender Squier guitaren vil først være tilgængelig fra første kvartal 2011. Spillet vil kunne købes alene eller i en pakke med spil og keyboard.

De 83 sange der vil være at finde i Rock Band 3 er:

1. Amy Winehouse – Rehab
2. Anthrax – Caught in a Mosh
3. At the Drive-In – One Armed Scissor
4. Avenged Sevenfold – Beast and the Harlot
5. The B-52s – Rock Lobster
6. The Beach Boys – Good Vibrations (Live)
7. Big Country – In a Big Country
8. Blondie – Heart of Glass
9. Bob Marley & The Wailers – Get Up, Stand Up
10. The Bronx – False Alarm
11. Chicago – 25 or 6 to 4
12. The Cure – Just Like Heaven
13. David Bowie – Space Oddity
14. Deep Purple – Smoke on the Water
15. Def Leppard – Foolin’
16. Devo – Whip It
17. Dio – Rainbow in the Dark
18. Dire Straits – Walk of Life
19. The Doobie Brothers – China Grove
20. The Doors – Break on Through (To the Other Side)
21. Dover – King George
22. Echo & the Bunnymen – The Killing Moon
23. Elton John – Saturday Night’s Alright For Fighting
24. Faith No More – MidLife Crisis
25. Filter – Hey Man, Nice Shot
26. The Flaming Lips – Yoshimi Battles the Pink Robots Pt. 1
27. Foreigner – Cold as Ice
28. Golden Earring – Radar Love
29. HIM – Killing Loneliness
30. Huey Lewis and the News – The Power of Love
31. Hypernova – Viva la Resistance
32. Ida Maria – Oh My God
33. INXS – Need You Tonight
34. The J. Geils Band – Centerfold
35. James Brown – I Got You (I Feel Good)
36. Jane’s Addiction – Been Caught Stealing
37. The Jimi Hendrix Experience – Crosstown Traffic
38. Joan Jett – I Love Rock N’ Roll
39. John Lennon – Imagine
40. Juanes – Me Enamora
41. Lynyrd Skynyrd – Free Bird
42. Maná – Oye Mi Amor
43. Marilyn Manson – The Beautiful People
44. Metric – Combat Baby
45. The Muffs – Outer Space
46. Night Ranger – Sister Christian
47. Ozzy Osbourne – Crazy Train
48. Paramore – Misery Business
49. Phish – Llama
50. Phoenix – Lasso
51. The Police – Don’t Stand So Close to Me
52. Poni Hoax – Antibodies
53. Pretty Girls Make Graves – Something Bigger, Something Brighter
54. Primus – Jerry Was a Race Car Driver
55. Queen – Bohemian Rhapsody
56. Queens of the Stone Age – No One Knows
57. Rammstein – Du Hast
58. The Ramones – I Wanna Be Sedated
59. Raveonettes – Last Dance
60. Rilo Kiley – Portions of Foxes
61. Riverboat Gamblers – Don’t Bury Me… I’m Still Not Dead
62. Roxette – The Look
63. Slipknot – Before I Forget
64. Smash Mouth – Walkin’ on the Sun
65. The Smiths – Stop Me If You’ve Heard This One Before
66. The Sounds – Living in America
67. Spacehog – In the Meantime
68. Steve Miller Band – Fly Like An Eagle
69. Stone Temple Pilots – Plush
70. Swingin’ Utters – This Bastard’s Life
71. T.Rex – 20th Century Boy
72. Tears for Fears – Everybody Wants to Rule the World
73. Tegan and Sara – The Con
74. Them Crooked Vultures – Dead End Friends
75. Tokio Hotel – Humanoid
76. Tom Petty and The Heartbreakers – I Need to Know
77. The Vines – Get Free
78. War – Low Rider
79. Warren Zevon – Werewolves of London
80. The White Stripes – The Hardest Button to Button
81. Whitesnake – Here I Go Again
82. The Who – I Can See for Miles
83. Yes – Roundabout